Detección y expresión de los receptores retinoicos RAR en la mucosa intestinal de crías de alpacas (Vicugna pacos)
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Fecha
2019Autor(es)
Rojas Chamochumbi, Tatiana Rubí
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Mostrar el registro completo del ítemResumen
Detecta el gen del receptor RARα del ácido retinoico
en alpacas adultas y su expresión en la mucosa yeyunal de crías de alpaca. Para la detección del
gen, se utilizaron leucocitos sanguíneos de 5 alpacas adultas aparentemente sanas, sin distinción
de raza o sexo; mientras que la expresión se determinó en 30 muestras de yeyuno de crías de
alpacas aparentemente sanas, con edades de 1 a 47 días, con ingestión de calostro y 3 muestras
de recién nacidos sin ingestión de calostro que se utilizaron como calibradores para la
cuantificación relativa de la expresión. Se tomaron 5 muestras de 5 ml de sangre entera obtenidas
por punción yugular de 5 alpacas adultas, se mezclaron para formar 2 pooles y se continuó el
procedimiento para obtener el ADN genómico utilizando el método del kit “PureLink™ Genomic
DNA Mini Kits” (Invitrogen, USA). Este ADN sirvió de templado para realizar la PCR con
primers específicos para el RARα. Las secciones de los 33 yeyunos se procesaron con Trizol®
Reagent, para obtener el ARN total y luego realizar la RT qPCR con primers específicos y
cuantificar relativamente el ARN mensajero de los receptores, utilizando el método . El
PCR convencional amplificó un producto de 626 pb con los primers específicos para determinar
la presencia del gen en el genoma de leucocitos; y el producto de RT- PCR con primers diseñados,
amplificaron un producto específico de 108 pb. En la cuantificación relativa de los ARN
mensajeros del gen RARα, todas expresaron al receptor. Se concluye que el gen del receptor
RARα está presente en el genoma de las alpacas y se expresa en la mucosa yeyunal de las crías
de alpaca.
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